Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), when induced in syngenic C57BL/6 mice by using myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG), usually exhibits a chronic progressive pattern. This model mimics many of the symptoms and clinical signs typical of multiple sclerosis (MS) in humans. The present work describes specific adjustments to the experimental parameters described in the literature that were necessary when implementing this model under our conditions, demonstrating the presence of EAE in experimental animals by means of clinical evaluations, molecular assays and ultrastructural studies. The disorder was induced by active immunization with peptide MOG35-55 emulsified in Freund's Incomplete Adjuvant supplemented with Mycobacterium tuberculosis, together with two additional administrations of Pertussis toxin. All immunized animals exhibited the typical clinical signs of EAE, with a severity that increased progressively from day 8 post-induction to the end of the evaluation, at day 28 post-induction. The maximum clinical score was 3.5, and the disorder was not reversible. Body weight loss was associated with clinical deterioration at the initial stages of the experiment. From a molecular perspective, it was shown that effector cytokines (mainly IL-17) were positively regulated in the brain of diseased animals. The characteristic ultrastructural changes of MS were also detected; namely, demyelination and axonal damage. The methodology described here enabled the implementation of an animal model that reproduces fundamental aspects of the pathogenesis of MS and is, therefore, highly useful for the study of physiopathological mechanisms, the identification of new pharmacological targets and the evaluation of specific biomolecules with therapeutic purposes.
La inducción de la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) mediante la glicoproteína de la mielina del oligodendrocito (MOG) en ratones C57BL/6 isogénicos y homocigóticos, se caracteriza por un patrón crónico progresivo. Este modelo remeda un amplio espectro de síntomas y signos clínicos típicos de la esclerosis múltiple (EM) en humanos. Se describe el ajuste de las condiciones experimentales con respecto a las referidas en la literatura, y se demuestra la generación del modelo mediante evaluaciones clínicas, moleculares y ultraestructurales. La enfermedad se indujo por inmunización activa con el encefalitógeno constituido por el péptido MOG35-55 emulsificado en adyuvante incompleto de Freund, suplementado con Mycobacterium tuberculosis y dos administraciones adicionales de toxina pertussis. Los animales inmunizados mostraron signos clínicos de EAE, cuya severidad aumentó en forma progresiva y ascendente a partir del día 8 después de la inducción, con un puntaje clínico máximo de 3.5, sin reversión hasta el día 28, en que finalizó el periodo de evaluación. La disminución del peso corporal estuvo asociada con el inicio del deterioro clínico. Desde el punto de vista molecular, se identificó una regulación positiva de citocinas efectoras en el cerebro de los animales enfermos, principalmente de la IL-17. Se observaron daños ultraestructurales característicos de la EM en la mielina y el axón. La metodología permitió la generación de un modelo animal con elementos esenciales de la patogénesis de la EM y, por tanto, útil para el estudio de mecanismos fisiopatológicos, la identificación de nuevos blancos farmacológicos y la evaluación de biomoléculas con fines terapéuticos.
